Технологията Guidling ви позволява да научите простия и ефикасен метод за обезсоляване и концентрация
Протеините често трябва да бъдат обезсолени след отделяне и пречистване и тези соли се получават главно от различни йони в живите организми (напр. натриеви йони, калиеви йони, хлоридни йони и др.), както и буферни соли в екстрактите, соли в елуенти и солеви компоненти на определени денатуранти, използвани за експерименти. Високата концентрация на сол може да повлияе на активността и стабилността на протеините, както и на техните взаимодействия с други молекули, генерирайки смущаващи сигнали или намалявайки точността на измерванията при последващи аналитични методи като електрофореза, масспектрометрия и кристалографски изследвания. Следователно е много необходимо да се обезсолят пречистените протеини след разделянето, а основните често използвани методи за обезсоляване са мембранна (диализа и ултрафилтрация) и гел филтрационна хроматография. Освен това в някои случаи обезсоляването може да се постигне и чрез разреждане.
Диализно обезсоляване, поради дългия цикъл и необходимостта от голям брой заместващи течности, приложението му е силно ограничено и се използва по-малко в промишлеността, но се използва главно частично в лабораторията, лабораторията също постепенно се заменя с ултрафилтрационни тръби /чаша за ултрафилтрация.
Основната технология за мембранно разделяне, използвана в процеса на обезсоляване и концентриране на протеини, е ултрафилтрацията. Ултрафилтрацията е технология за мембранно разделяне с висока ефективност, ниска консумация на енергия, без фазова промяна, без нужда от добавяне на химически реагенти, лесна работа, меки условия, способността да поддържа по-добре активността на биологичните макромолекули, висока степен на възстановяване и други предимства и използването му при разделяне и пречистване на протеини има уникални предимства.
Ултрафилтрацията е метод за мембранно филтриране, който използва пореста мембрана като среда за разделяне и разчита на разликата в налягането между двете страни на мембраната като движеща сила за разделяне на вещества с различно молекулно тегло в разтвора, като по този начин играе роля в обезсоляването, концентрацията и пречистване. Това е нов метод, разработен през последните години, който е най-подходящ за концентрация или обезсоляване на биологични макромолекули, особено протеини и ензими. Ключът към прилагането на ултрафилтрация е изборът на мембрана, различните видове и спецификации на мембраната, имат разлика в скоростта на водния поток, прекъсване на молекулното тегло и други параметри, трябва да бъдат избрани според съответните работни нужди. В допълнение, формата на устройството за ултрафилтрация, съставът и свойствата на разтвореното вещество, концентрацията на разтвора и т.н. имат определено влияние върху ефекта на ултрафилтрацията.
Прилагането на ултрафилтрационна технология за обезсоляване и концентриране на протеини в процеса на пречистване на протеини се характеризира с нейната пригодност за третиране на големи количества течности, вариращи от няколкостотин до няколко хиляди литра с предимствата на простота на работа, спестяване на време и висока скорост на възстановяване на протеина. Методът на ултрафилтрация е узрял от ултрафилтрационни тръби за лабораторна обработка на микрообем, ултрафилтрационни чаши за обработка на малък обем и ултрафилтрационни системи за промишлена употреба.
Ултрафилтрацията се подразделя на ултрафилтрация с директно налягане и филтрация с тангенциален поток и в момента филтрирането с тангенциален поток се използва главно в индустрията, което се използва широко при обезсоляване и замяна на буфер.
Следното е пример за приложението на ултрафилтрационните мембранни касети на Guidling Technology при обезсоляване и концентриране на протеини.
Използвахме мембранна касета {{0}}.11㎡ 10 kd размер на порите (G01100010K) за обезсоляване и концентриране на 500 mL PEG-модифициран разтвор на растежен хормон при концентрация от 0,2 mg/mL. По време на процеса на ултрафилтрация бяха изследвани скоростта на обезсоляване, скоростта на възстановяване на протеина, състоянието на повреда на мембранния поток и скоростта на възстановяване на водния поток.
Преди и след употреба тествахме водния поток на мембранната касета отделно и степента на възстановяване на мембранните касети достигна 98% при предпоставката за поддържане на същата скорост на подаване, налягане на подаване и налягане на обратен хладник.
Целият процес обработи общо 2L материал и отне 40min, 0-5min беше процесът на концентрация, 5-35min беше процесът на обмен на течности и 35-40min беше процесът на свръхконцентрация. По време на процеса на ултрафилтрация TMP се стабилизира между 0.7-0.8 бара, скоростта на подаване е постоянна и средният поток на материала е 27 LMH.
2L материал, концентриран течен обмен до 60mL, около 33 пъти концентриран, степента на обезсоляване достига до 99%, степента на възстановяване достига до 80%, след измиване, увеличение от 50mL течност, общото възстановяване от 88%, промишлено производство според мъртвият обем на изчисленията на тръбопровода, доколкото е възможно, за да се увеличи броят пъти на горното измиване, общото горно измиване 3 пъти може да бъде напълно възстановено.
Мембранните касети на Guidling Technology са изработени от медицински инертни материали със силна устойчивост на корозия и могат да издържат на силно алкално почистване; използването на автоматизиран производствен процес гарантира непрекъснатост и надеждност на качеството на продукта, по-висока механична якост, устойчивост на обратно налягане и многократно изплакване; има супер хидрофилност, която може да даде на мембраната по-висок поток и по-ниска адсорбция на протеини; ние също имаме оптимизиран дизайн на канала за потока с по-малък спад на налягането, което улеснява преноса на материала и значително съкращава времето за филтриране.
Нашите мембранни касети се предлагат в широк диапазон от размери на порите, от 1kd до 1000kd. Сред тях 1-10kd ултрафилтрационни мембранни касети могат да се използват за обезсоляване и отстраняване на пироген; 30kd ултрафилтрационни мембранни касети могат да се използват за концентрация на моноклонални антитела и заместване на буфера; в същото време нашите продукти от кухи влакна могат също да се използват за концентрация и замяна на биологични продукти с размер на порите от 100 kd, 300 kd и 500 kd, които се използват главно за голям брой приложения в продукти за ваксини.
Guidling Technology е национално високотехнологично предприятие, фокусирано върху биофармацевтични продукти, клетъчни култури, пречистване и концентрация на биомедицина, диагностика и индустриални течности. Ние успешно разработихме центробежни филтърни устройства, ултрафилтрационни и микрофилтрационни касети, вирусен филтър, TFF система, дълбочинен филтър, кухи влакна и т.н. Които напълно отговарят на сценариите за приложение на биофармацевтични продукти, клетъчни култури и т.н. Нашите мембрани и мембранни филтри се използват широко при концентрация, екстракция и разделяне на предварителна филтрация, микрофилтрация, ултрафилтрация и нанофилтрация. Нашите многобройни продуктови линии, от малка лабораторна филтрация за еднократна употреба до производствени филтриращи системи, тестове за стерилност, ферментация, клетъчни култури и други, отговарят на нуждите от тестване и производство. Guidling Technology очаква с нетърпение да си сътрудничи с вас!
