Метод за поддръжка и използване на ултрафилтрационна тръба

Метод за поддръжка и използване на ултрафилтрационна тръба

Функция на ултрафилтрационната тръба:

1) Концентрация; 2) Обезсоляване; 3) Сменете буфера; 4) Има ефект на частично пречистване.

1. Новата ултрафилтрационна тръба може да се използва директно без друго третиране;

2. Ултрафилтрационната тръба не може да се стерилизира при висока температура;

3. Обработка на ултрафилтрационна тръба при смяна на концентриран протеин

Ултрафилтрационната тръба може да се използва повторно. Накиснете го в 0.1M NaOH за 1-2 часа, измийте го с вода и след това го измийте със съответния разтвор (стерилизирана вода или PBS) на центрофугата за 3 пъти, което може да се използва за концентриране на нов протеин;

4. Обработка на нормално поставена ултрафилтрационна тръба

За често използваната епруветка за ултрафилтрация я накиснете в 0.1M NaOH за 1-2 часа, измийте я с вода и я накиснете в стерилизирана вода. Не забравяйте да поддържате филтърната мембрана мокра и да предотвратите развитието на бактерии;

5. Обработка на ултрафилтрационна тръба, поставена за дълго време

Ако тръбата за ултрафилтрация не се използва дълго време, накиснете я в 0.1M NaOH за 1-2 часа, измийте я с вода и я накиснете в 20 процента етанол за съхранение. Не забравяйте да поддържате филтърната мембрана мокра и да предотвратите развитието на бактерии;

6. Центробежна скорост, използвана за ултрафилтрационна тръба

Центробежната скорост обикновено е 4000rpm (3000g обикновено се препоръчва, а максимумът не може да надвишава 4000g). След центрофугиране в продължение на 5-8 минути, 4ml проба може да се концентрира до по-малко от 1ml до десетки микролитри; Ако скоростта е твърде висока, целевият протеин ще падне, което ще доведе до загуба на целевия протеин; Ниска скорост, отнема много време и ниска ефективност на работа;

7. Предпазни мерки, когато главата на пистолета се простира в ултрафилтрационната тръба

Когато се добавя протеинов разтвор или буфер към ултрафилтрационната тръба, може да се използва синята глава на пистолета; Въпреки това, когато концентрираният целеви протеин се абсорбира от дъното на ултрафилтрационната тръба, трябва да се използва жълтата глава на пистолета; Когато главата на пистолета е поставена в ултрафилтрационната тръба, тя трябва да бъде предпазена от докосване на филтърната мембрана, за да се избегне пробиване на филтърната мембрана;

8. Намалете загубата на протеинова адсорбция от ултрафилтрационната тръба

Мембраната на ултрафилтрационната тръба може да адсорбира протеин, което ще намали целевия протеин с около 30 процента; За да се намали загубата на протеин, след абсорбиране на разтвора на целевия протеин, прочистете дъното на ултрафилтрационната тръба с протеинов буфер, за да измиете по-голямата част от протеина, адсорбиран от филтърната мембрана, и да намалите загубата на целевия протеин; Ако пречистеният протеин е концентриран, обърнете внимание, че концентрираният обем не трябва да бъде твърде малък; Като цяло, независимо колко центрофугиран е, около 200 µL протеинов разтвор ще се задържа на дъното;

9. Как да определим повредата на ултрафилтрационната тръба

При нормална употреба, когато филтърната мембрана не е пробита, концентрираният протеинов разтвор не съдържа протеин или количеството е много ниско (включително целевия протеин), докато първият филтриран разтвор съдържа целеви протеин, това показва, че филтърната мембрана е невалидна и трябва да се смени с нова ултрафилтрационна тръба.